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抗血清的制備

抗血清指含有抗體的血清。傳統的抗血清制備方法是將某種抗原通過多次注入動物,數十天后或數月后,采集動物血,立即分離出血清。此抗血清在保存或應用前必須作效價和特異性鑒定及純化。

(一)免疫動物的選擇  

免疫動物的選擇基本要求:  

1.抗原與免疫動物的種屬差異越遠越好。  

2.動物必須適齡、健壯、無感染、體重合乎要求。  

3.不同動物對同一免疫原有不同的免疫應答表現。因此針對不同性質的免疫原,選用相應的動物。蛋白質抗原大部分動物皆適合;甾類激素多用家免;酶類多用豚鼠。  

4.抗血清要求:為R(rabbit)型或H(horse)型血清。R型抗血清是以家兔為代表的小型動物產生的抗血清,能和很小量抗原結合形成沉淀線,而H型抗血清則以馬為代表的大型動物產生的抗血清,較少用于沉淀反應。

    此外需要制備大量免疫血清時,應選用馬、綿羊等大動物;若需要量不多,則選用家兔、豚鼠和雞等小動物。

(二)免疫方法及途徑  

1.免疫原的注射劑量:應考慮抗原性強弱、分子量大小、動物的個體狀態和免疫時間??贵w需要量多,時間間隔長,劑量可適當加大。  

2.免疫途徑:通常有靜脈、腹腔、肌肉、皮內、皮下、淋巴結及足掌等。若抗原寶貴可采用淋巴結內微量注射法;半抗原宜皮內多點注射。  

3.免疫方案:根據設計的目的要求、抗原性質、佐劑的種類來制定免疫方案??刹捎萌棵庖叻?、微量免疫法或混合免疫法。  

4.抗體產生階段:可分靜止期(約2天,血中尚無抗體);指數期(約4天左右,抗體迅速上升);穩定期(約2~4周,抗體保持一個穩定水平);下降期(約幾個月后,此時抗體緩慢下降)四個階段。

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